■ Хуткая праца: РНК можна атрымаць на працягу 30 хвілін.
■ Высокая чысціня: Крэмніевая мембрана пазбаўляе ад большасці прымешак, а калонка для выдалення гДНК пазбаўляе ад геномнай ДНК.
■ Шырокае прымяненне: падыходзіць для розных узораў, такіх як тканіны, клеткі і бактэрыі.
Тып: Спін -калонка на аснове
Узор і пачатковы аб'ём: 10-20 мг тканіны або <107 клеткі
Мэта: РНК
Час працы: ~ 30 мін
Ніжэйшыя праграмы: RT-PCR/RT-qPCR, паўночная клякса, кропкавая кропка, адбор полі (А), трансляцыя in vitro, аналіз абароны ад РНКазы, малекулярнае кланаванне і г.д.
Усе прадукты можна наладзіць для ODM/OEM. Для падрабязнасцей,калі ласка, націсніце Індывідуальнае абслугоўванне (ODM/OEM)
РНК, экстрагаваная з 15 мг пробы печані пацукоў з дапамогай набору РНК Easy Fast Tissue/Cell Kit і адпаведнага прадукту ад пастаўшчыкоў А і Т. Аб'ём элюцыі: 100 мкл; Аб'ём загрузкі: 3 мкл M: маркер TIANGEN D15000 Вынік эксперыменту: RNA Easy Fast Tissue/Cell Kit мае больш высокую хуткасць экстракцыі, чым адпаведны прадукт ад пастаўшчыкоў A і T. |
А-1 клеткавага лізісу або гомагенізацыі недастаткова
---- Паменшыць выкарыстанне пробы, павялічыць колькасць буфера для лізісу, павялічыць час гамагенізацыі і часу лізісу.
A-2 Колькасць пробы занадта вялікая
---- Паменшыць колькасць выкарыстанага ўзору або павялічыць колькасць буфера для лізісу.
А-1 Недастатковы лізіс або гамагенізацыя клетак
---- Паменшыць выкарыстанне пробы, павялічыць колькасць буфера для лізісу, павялічыць час гамагенізацыі і часу лізісу.
A-2 Колькасць пробы занадта вялікая
---- Калі ласка, звярніцеся да максімальнай магутнасці апрацоўкі.
А-3 РНК не элюируется цалкам з калонкі
---- Пасля дадання вады без РНКазы пакіньце яе на некалькі хвілін перад цэнтрыфугаваннем.
А-4 Этанол у элюенце
---- Пасля прамывання зноў центрифугируйте і максімальна выдаліце пральны буфер.
Сярэдняе культуральнае асяроддзе А-5 выдалена не цалкам
---- Пры зборы клетак не забудзьцеся максімальна выдаліць пажыўнае асяроддзе.
А-6 Клеткі, якія захоўваюцца ў RNAstore, эфектыўна не цэнтрыфугуюцца
---- шчыльнасць РНК-сховішча больш, чым у сярэднім асяроддзі культуры клетак; таму цэнтрабежную сілу трэба павялічыць. Прапануецца цэнтрыфугаваць пры 3000x g.
A-7 Нізкае ўтрыманне і колькасць РНК у пробе
---- Выкарыстоўвайце станоўчы ўзор, каб вызначыць, ці выкліканы ўзор нізкім ураджаем.
A-1 Матэрыял не свежы
---- Свежыя тканіны трэба неадкладна захоўваць у вадкім азоце або адразу ж пакласці ў рэагент RNAstore для забеспячэння эфекту экстракцыі.
A-2 Колькасць пробы занадта вялікая
---- Паменшыць колькасць узораў.
Заражэнне А-3 РНКазайn
---- Хоць буфер, які ўваходзіць у камплект, не ўтрымлівае РНКазы, у працэсе экстракцыі РНКазу лёгка забрудзіць, і з ёй трэба звяртацца асцярожна.
А-4 Забруджванне электрафарэзам
---- Замяніце буфер электрафарэзу і пераканайцеся, што расходныя матэрыялы і загрузачны буфер не маюць забруджванняў РНКазай.
А-5 Занадта вялікая нагрузка для электрафарэзу
---- Паменшыць колькасць загрузкі пробы, загрузка кожнай лункі не павінна перавышаць 2 мкг.
A-1 Сума пробы занадта вялікая
---- Паменшыць колькасць узораў.
A-2 Некаторыя ўзоры маюць высокае ўтрыманне ДНК і могуць быць апрацаваны ДНКазай.
---- Выканайце апрацоўку ДНКазы без РНКаз да атрыманага раствора РНК, і РНК можна выкарыстоўваць непасрэдна для наступных эксперыментаў пасля апрацоўкі або дадаткова ачысціць з дапамогай набораў для ачысткі РНК.
Для вырабаў са шкла, выпечаных пры 150 ° С на працягу 4 гадзін. Для пластыкавых кантэйнераў апускаюць у 0,5 М NaOH на 10 хвілін, затым старанна прамываюць вадой без РНКазы, а затым стэрылізуюць для поўнага выдалення РНКазы. Рэагенты або растворы, якія выкарыстоўваюцца ў эксперыменце, асабліва вада, павінны быць без РНКазы. Выкарыстоўвайце ваду без РНКазы для ўсіх прэпаратаў з рэагентамі (дадайце ваду ў чыстую шкляную бутэльку, дадайце DEPC да канчатковай канцэнтрацыі 0,1% (V/V), узварушыце на ноч і аўтаклавіруйце).
З моманту свайго заснавання наша фабрыка распрацоўвае прадукты першага сусветнага класа з захаваннем прынцыпу
якасць у першую чаргу. Наша прадукцыя заваявала выдатную рэпутацыю ў прамысловасці і каштоўную давер сярод новых і старых кліентаў.