Універсальны рэагент TRNzol
Асаблівасці
■ Высокая гнуткасць: дзікі дыяпазон зыходнага аб'ёму пробы, прыдатны для экстракцыі пробы з вялікім аб'ёмам у адной рэакцыі.
■ Высокі выхад: метад ападкаў максімізуе выхад РНК ва ўзоры.
■ Шырокае прымяненне: падыходзіць для мноства розных узораў, такіх як раслінныя і жывёльныя тканіны, культываваныя клеткі, кроў, вадкасць арганізма і г.д.
■ Хуткая праца: геномную ДНК можна атрымаць на працягу 1 гадзіны.
Спецыфікацыя
Тып: На аснове ападкаў
Узор: Вірус, бактэрыі, грыбы, жывёльныя, раслінныя тканіны, культываваныя клеткі і вадкасць арганізма.
Мэта: РНК
Час працы: ~ 1 гадзіна
Прыкладання: Універсальны рэагент TRNzol мінімізуе забруджванне прымешак, такіх як ДНК і вавёркі, у вычышчанай агульнай РНК, і можа быць непасрэдна выкарыстаны для розных эксперыментаў па малекулярнай біялогіі, такіх як паўночная клякса, кропкавая клякса, скрынінг PolyA, аналіз абароны РНКазы, будаўніцтва бібліятэкі кДНК , РТ-ПЦР, ПЦР у рэальным часе і высокапрадукцыйнае секвенирование.
Усе прадукты можна наладзіць для ODM/OEM. Для падрабязнасцей,калі ласка, націсніце Індывідуальнае абслугоўванне (ODM/OEM)
Метад: 30 мг тканіны печані пацука, 100 мг рысавага лісця збіралі шляхам драбнення вадкім азотам; 1 × 106Клеткі, культываваныя HepG2, і 700 мкл культуральнага асяроддзя Saccharomyces Cerevisiae (OD600 = 0,9) адбіралі цэнтрыфугаваннем. 1 мл універсальнага рэагента TRNzol ад TIANGEN і адпаведныя прадукты ад пастаўшчыка L і T былі дададзеныя ў кожную аліквоту пробы і экстракцыя РНК была выканана ў адпаведнасці з пратаколамі, прадстаўленымі кожным пастаўшчыком. Аб'ём элюцыі склаў 80 мкл, 50 мкл, 30 мкл і 30 мкл для чатырох пробаў адпаведна. 3 мкл элюата загружалі на паласу.
MIII: маркер TIANGEN III;
Электрафарэз праводзілі пры 6 В/см на працягу 30 мін на 1% агарозе.
Вынікі: Універсальны рэагент TIANGEN TRNzol можа з высокай эфектыўнасцю здабываць РНК высокай чысціні і добрай цэласнасці з печані пацукоў, лісця рысу, культываваных клетак і проб дрожджаў. Якасць РНК супастаўная ці крыху вышэйшая за якасць прадукцыі L і T пастаўшчыка.
А-1 клеткавага лізісу або гомагенізацыі недастаткова
---- Паменшыць выкарыстанне пробы, павялічыць колькасць буфера для лізісу, павялічыць час гамагенізацыі і часу лізісу.
A-2 Колькасць пробы занадта вялікая
---- Паменшыць колькасць выкарыстанага ўзору або павялічыць колькасць буфера для лізісу.
А-1 Недастатковы лізіс або гамагенізацыя клетак
---- Паменшыць выкарыстанне пробы, павялічыць колькасць буфера для лізісу, павялічыць час гамагенізацыі і часу лізісу.
A-2 Колькасць пробы занадта вялікая
---- Калі ласка, звярніцеся да максімальнай магутнасці апрацоўкі.
А-3 РНК не элюируется цалкам з калонкі
---- Пасля дадання вады без РНКазы пакіньце яе на некалькі хвілін перад цэнтрыфугаваннем.
А-4 Этанол у элюенце
---- Пасля прамывання зноў центрифугируйте і максімальна выдаліце пральны буфер.
Сярэдняе культуральнае асяроддзе А-5 выдалена не цалкам
---- Пры зборы клетак не забудзьцеся максімальна выдаліць пажыўнае асяроддзе.
А-6 Клеткі, якія захоўваюцца ў RNAstore, эфектыўна не цэнтрыфугуюцца
---- шчыльнасць РНК-сховішча больш, чым у сярэднім асяроддзі культуры клетак; таму цэнтрабежную сілу трэба павялічыць. Прапануецца цэнтрыфугаваць пры 3000x g.
A-7 Нізкае ўтрыманне і колькасць РНК у пробе
---- Выкарыстоўвайце станоўчы ўзор, каб вызначыць, ці выкліканы ўзор нізкім ураджаем.
A-1 Матэрыял не свежы
---- Свежыя тканіны трэба неадкладна захоўваць у вадкім азоце або адразу ж пакласці ў рэагент RNAstore для забеспячэння эфекту экстракцыі.
A-2 Колькасць пробы занадта вялікая
---- Паменшыць колькасць узораў.
Заражэнне А-3 РНКазайn
---- Хоць буфер, які ўваходзіць у камплект, не ўтрымлівае РНКазы, у працэсе экстракцыі РНКазу лёгка забрудзіць, і з ёй трэба звяртацца асцярожна.
А-4 Забруджванне электрафарэзам
---- Замяніце буфер электрафарэзу і пераканайцеся, што расходныя матэрыялы і загрузачны буфер не маюць забруджванняў РНКазай.
А-5 Занадта вялікая нагрузка для электрафарэзу
---- Паменшыць колькасць загрузкі пробы, загрузка кожнай лункі не павінна перавышаць 2 мкг.
A-1 Сума пробы занадта вялікая
---- Паменшыць колькасць узораў.
A-2 Некаторыя ўзоры маюць высокае ўтрыманне ДНК і могуць быць апрацаваны ДНКазай.
---- Выканайце апрацоўку ДНКазы без РНКаз да атрыманага раствора РНК, і РНК можна выкарыстоўваць непасрэдна для наступных эксперыментаў пасля апрацоўкі або дадаткова ачысціць з дапамогай набораў для ачысткі РНК.
Для вырабаў са шкла, выпечаных пры 150 ° С на працягу 4 гадзін. Для пластыкавых кантэйнераў апускаюць у 0,5 М NaOH на 10 хвілін, затым старанна прамываюць вадой без РНКазы, а затым стэрылізуюць для поўнага выдалення РНКазы. Рэагенты або растворы, якія выкарыстоўваюцца ў эксперыменце, асабліва вада, павінны быць без РНКазы. Выкарыстоўвайце ваду без РНКазы для ўсіх прэпаратаў з рэагентамі (дадайце ваду ў чыстую шкляную бутэльку, дадайце DEPC да канчатковай канцэнтрацыі 0,1% (V/V), узварушыце на ноч і аўтаклавіруйце).
Катэгорыі прадуктаў
Чаму выбіраюць нас
З моманту свайго заснавання наша фабрыка распрацоўвае прадукты першага сусветнага класа з захаваннем прынцыпу
якасць у першую чаргу. Наша прадукцыя заваявала выдатную рэпутацыю ў прамысловасці і каштоўную давер сярод новых і старых кліентаў.
- Тэл .: +86 010-59822688
- Будынак 5, No 86, Shuangying West Road, раён Чанпін, Пекін.
- people@tiangen.com
