Набор простых РНК

Для высокаэфектыўнай экстракцыі агульнай РНК выкарыстоўваецца шырока выкарыстоўваная цэнтрабежная калонка.

У камплекце РНК з простым РНК выкарыстоўваецца новы метад экстракцыі РНК, заснаваны на метадзе изотиоцианата гуанидиния/фенолу. Буфер RZ, спецыяльна распрацаваны TIANGEN, можа хутка і эфектыўна выдаляць геномную ДНК і вавёркі з клетак, робячы атрыманую РНК вельмі чыстай і стабільнай.
Гэты набор выкарыстоўваецца для аддзялення агульнай РНК ад крыві, клетак жывёл, тканін і тканін раслін. Кожная спінавая калонка можа апрацоўваць 50-100 мг тканіны або 5 × 106клеткі адначасова і можа апрацоўваць вялікая колькасць розных узораў адначасова. Рэакцыя можа завяршыцца менш чым за адну гадзіну, а агульная вынятая РНК мае больш высокі выхад, лепшую чысціню, без забруджвання ДНК і бялкоў, і можа быць выкарыстана ў розных эксперыментах па плыні.

Котка. Не Памер ўпакоўкі
4992858 50 падрыхтоўчых мерапрыемстваў

Дэталь прадукту

Рабочы працэс

Эксперыментальны прыклад

Пытанні і адказы

Тэгі прадуктаў

Асаблівасці

■ Гатовая да выкарыстання РНК высокай чысціні падыходзіць для адчувальных прыкладанняў ніжэй па плыні.
■ Шырокае прымяненне: Ачышчаную РНК можна наносіць на розныя эксперыментальныя пробы.
■ Эксперымент можна завяршыць за 1 гадзіну з дапамогай простых аперацый.

Прыкладанні

■ RT-PCR
■ Паўночная пляма, кропкавая пляма.
■ ПЦР ў рэальным часе
■ Скрынінг PolyA, трансляцыя in vitro, аналіз абароны ад РНКазы, малекулярнае кланаванне.

Усе прадукты можна наладзіць для ODM/OEM. Для падрабязнасцей,калі ласка, націсніце Індывідуальнае абслугоўванне (ODM/OEM)


  • Папярэдні:
  • Далей:

  • product_certificate04 product_certificate01 product_certificate03 product_certificate02
    ×

    Workflow

    Experimental Example Матэрыял: тканіна селязёнкі пацукоў 20 мг
    Метад: Агульную РНК тканіны селязёнкі пацукоў вылучалі з дапамогай набору простых РНК.
    Вынікі: Калі ласка, глядзіце малюнак электрафарэзу з агарозным гелем. 2-4 мкл 100 мкл элюатаў загружалі на паласу. Электрафарэз праводзілі пры 6 В/см на працягу 30 мін на 1% агарозе.
    Пытанне: завал калонкі

    А-1 клеткавага лізісу або гомагенізацыі недастаткова

    ---- Паменшыць выкарыстанне пробы, павялічыць колькасць буфера для лізісу, павялічыць час гамагенізацыі і часу лізісу.

    A-2 Колькасць пробы занадта вялікая

    ---- Паменшыць колькасць выкарыстанага ўзору або павялічыць колькасць буфера для лізісу.

    Пытанне: Нізкі выхад РНК

    А-1 Недастатковы лізіс або гамагенізацыя клетак

    ---- Паменшыць выкарыстанне пробы, павялічыць колькасць буфера для лізісу, павялічыць час гамагенізацыі і часу лізісу.

    A-2 Колькасць пробы занадта вялікая

    ---- Калі ласка, звярніцеся да максімальнай магутнасці апрацоўкі.

    А-3 РНК не элюируется цалкам з калонкі

    ---- Пасля дадання вады без РНКазы пакіньце яе на некалькі хвілін перад цэнтрыфугаваннем.

    А-4 Этанол у элюенце

    ---- Пасля прамывання зноў центрифугируйте і максімальна выдаліце ​​пральны буфер.

    Сярэдняе культуральнае асяроддзе А-5 выдалена не цалкам

    ---- Пры зборы клетак не забудзьцеся максімальна выдаліць пажыўнае асяроддзе.

    А-6 Клеткі, якія захоўваюцца ў RNAstore, эфектыўна не цэнтрыфугуюцца

    ---- шчыльнасць РНК-сховішча больш, чым у сярэднім асяроддзі культуры клетак; таму цэнтрабежную сілу трэба павялічыць. Прапануецца цэнтрыфугаваць пры 3000x g.

    A-7 Нізкае ўтрыманне і колькасць РНК у пробе

    ---- Выкарыстоўвайце станоўчы ўзор, каб вызначыць, ці выкліканы ўзор нізкім ураджаем.

    Пытанне: дэградацыя РНК

    A-1 Матэрыял не свежы

    ---- Свежыя тканіны трэба неадкладна захоўваць у вадкім азоце або адразу ж пакласці ў рэагент RNAstore для забеспячэння эфекту экстракцыі.

    A-2 Колькасць пробы занадта вялікая

    ---- Паменшыць колькасць узораў.

    Заражэнне А-3 РНКазайn

    ---- Хоць буфер, які ўваходзіць у камплект, не ўтрымлівае РНКазы, у працэсе экстракцыі РНКазу лёгка забрудзіць, і з ёй трэба звяртацца асцярожна.

    А-4 Забруджванне электрафарэзам

    ---- Замяніце буфер электрафарэзу і пераканайцеся, што расходныя матэрыялы і загрузачны буфер не маюць забруджванняў РНКазай.

    А-5 Занадта вялікая нагрузка для электрафарэзу

    ---- Паменшыць колькасць загрузкі пробы, загрузка кожнай лункі не павінна перавышаць 2 мкг.

    Пытанне: заражэнне ДНК

    A-1 Сума пробы занадта вялікая

    ---- Паменшыць колькасць узораў.

    A-2 Некаторыя ўзоры маюць высокае ўтрыманне ДНК і могуць быць апрацаваны ДНКазай.

    ---- Выканайце апрацоўку ДНКазы без РНКаз да атрыманага раствора РНК, і РНК можна выкарыстоўваць непасрэдна для наступных эксперыментаў пасля апрацоўкі або дадаткова ачысціць з дапамогай набораў для ачысткі РНК.

    Пытанне: Як выдаліць РНКазу з эксперыментальных расходных матэрыялаў і вырабаў са шкла?

    Для вырабаў са шкла, выпечаных пры 150 ° С на працягу 4 гадзін. Для пластыкавых кантэйнераў апускаюць у 0,5 М NaOH на 10 хвілін, затым старанна прамываюць вадой без РНКазы, а затым стэрылізуюць для поўнага выдалення РНКазы. Рэагенты або растворы, якія выкарыстоўваюцца ў эксперыменце, асабліва вада, павінны быць без РНКазы. Выкарыстоўвайце ваду без РНКазы для ўсіх прэпаратаў з рэагентамі (дадайце ваду ў чыстую шкляную бутэльку, дадайце DEPC да канчатковай канцэнтрацыі 0,1% (V/V), узварушыце на ноч і аўтаклавіруйце).

    Напішыце сваё паведамленне тут і адпраўце яго нам